sábado, 4 de junio de 2016

Prueba Molecular ,Cancer Gastrico; Cinco Razones Científico-Técnicas de por qué la escogió


PRUEBA MOLECULAR

RAZONES CIENTÍFICAS-TÉCNICAS 


Esta técnica es de gran aplicabilidad en una variedad de campos, incluidas la biología molecular, la biotecnología, la genética, la epidemiología, las ciencias forestales, las ciencias forenses, la microbiología, el diagnóstico de enfermedades infecciosas.

2 Tiene  alta especificidad y sensibilidad la PCR; esta ha demostrado ser muy útil en el diagnóstico de virus, parásitos y bacterias de difícil cultivo.

3 La secuencia específica de interés no necesita estar aislada del resto de su genoma, pero una vez completada su reproducción, esta puede ser separada del resto del ADN por medio de electroforesis en geles de agarosa.

 La cantidad de material  para el inicio de la reacción es muy pequeña y solo es necesario la cantidad de ADN contenida en una sola célula, esto le ofrece una alta sensibilidad a la prueba.

 Amplifica o reproduce in vitro un número de copias de una región específica de ADN, con la finalidad de reproducir cantidad suficiente de un fragmento para su evaluación.



Diagnóstico de Helicobacter pylori mediante la reacción en cadena de la polimerasa


INTRODUCCION

Con la aparición de las pruebas moleculares se ha podido detectar H. pylori en muestras que no son de biopsias gástricas y que era muy difícil obtener resultados positivos para esta bacteria por metodología convencional; es así como se ha podido determinar su presencia en muestras de placa dental, aftas bucales, saliva, jugos gástricos, heces y placa ateromatosa, ofreciendo una mejor alternativa para el diagnóstico clínico y para estudios de investigación relacionados con su modo de transmisión; como por ejemplo la transmisión de reservorios en agua de consumo no potable o por la contaminación de los acueductos.


El diagnóstico por PCR de H. pylori tiene una sensibilidad y especificidad de 95 % y su principal ventaja es que se puede detectar el microorganismo sin importar la viabilidad de la bacteria en las muestras.
La especificidad de esta técnica viene dada por el uso de oligonucleótidos sintéticos, específicos para determinado gen y que facilitan la amplificación de una secuencia nucleotídica, que a su vez es específica para el H. pylori(tabla); es por esta razón que en los últimos años se ha diseñado una variedad de pruebas diagnósticas para esta bacteria por medio de PCR basándose en:

Oligonucleótidos provenientes del gen de la ureasa A (ureA). 
Oligonucleótidos provenientes de los genes que codifican el 16s ARN ribosomal (16s rRNA) 
Oligonucleótidos provenientes de secuencias al azar (ramdon sequence). 
Oligonucleótidos provenientes del gen de la fosfoglucosamin mutasa (glmM).
Oligonucleótidos que determinan variantes alélicas del gen vacA.
Bibliografía:

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0375-07602004000200001

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